chromatografia.doc

WYSOKOSPRAWNA CHROMATOGRAFIA GAZOWA (GC) W ANALIZIE TOKSYCZNYCH ZANIECZYSZCZEŃ WODY I POWIETRZA

Ćwiczenie CG-1

Oznaczanie THM-ów w wodzie

              Celem ćwiczenia jest ilościowe oznaczanie stężenia trihalogenometanów- chloroformu, bromodichlorometanu, chlorodibromometanu i bromoformu w próbkach wody wodociągowej.

Odczynniki i aparatura

1.      Chromatograf gazowy Hewlett Packard HP 6890 wyposażony w następujące elementy:

·         Dozownik typu split/splitles,

·         Kolumną kapilarną HP-1 (Metyl Siloxane 30 m X 0,53 m X 2,65 m ),

·         Detektor wychwytu elektronów ECD63Ni,

·         Komputer- program HP ChemStation A.05.01 (obsługa aparatu, rejestracja chromatografów i analiza danych).

2.      Mikrostrzykawka Hamiltona 1µ1.

3.      Probówki miarowe 15 ml ze szlifem + korki.

4.      Pipety Mohra 10 ml i 1ml.

5.      Pentan do chromatografii gazowej.

Wykonanie ćwiczenia

1)     Pobranie prób wody z sieci wodociągowej

Próbki wody wodociągowej pobrano do butelek około 0,5 l w dniu wykonania ćwiczenia z ul. Zwierzynieckiej 6 i Zamenhofa 29. Przed napełnieniem butelki odkręcono kran na kilka minut, by woda w rurach wodociągowych spłynęła. Butelkę napełniono tak, że nie było w niej powietrza i szczelnie zamknięto.

2)     Przygotowanie próbek do analizy

Za pomocą pipety pobrano z każdej butelki po 10 ml wody wodociągowej i przeniesiono do próbówek miarowych. Następnie do każdej probówki z próbką wody wodociągowej dodano po 1ml pentanu i zamknięto szczelnie korkiem.

3)     Ekstrakcja pentanem

Na początku wstrząśnięto próbkę przez około minutę. Pozostawiono próbkę w statywie w celu rozdzielenia warstw. Po rozdzieleniu warstwy organicznej pobrano za pomocą warstwy mikropipety 1µ 1 warstwy pentanu. Później wprowadzono igłę strzykawki do komory dozownika i wykonano nastrzyk, jednocześnie wciskając klawisz Start na panelu sterowania chromatografu. Rejestracja chromatografu odbyła się automatycznie i sterowana była przez komputer. Strzykawkę pozostawiono na około 12 minuty w komorze dozownika obserwując rejestrowany chromatograf.

Wyniki pomiarów

Wyniki pomiarów przedstawiono na załączonym wydruku z chromatografu. Jednak w dalszych analizach i obliczeniach brano pod uwagę dwa wydruki: próba nr 1- ul. Zwierzyniecka i próba nr 2- ul. Zamenhofa. Dwa wydruki z ul. Zwierzynieckiej, różnią się od analizowanej próby, a tym samym oznaczone THM-ów mają różne stężenia.                                          Korzystając z chromatografu na podstawie czasów retencji zidentyfikowano związki w badanych próbkach wód. Następnie z tablicy integracyjnej odczytano pola powierzchni pików i odpowiadające im stężenia. Później na podstawie krzywych wzorcowych pobranych z książki odczytano stężenia dla wyliczonych pól pików. Porównano wyniki z wydrukami.

Próbka nr 1- ul. Zwierzyniecka ( ng/ml=µg/kg)

Próbka nr 2- ul. Zamehofa ( ng/ml=µg/kg)

Wnioski

Przeprowadzone doświadczenie pozwoliło na ilościowe oznaczenie THM-ów, przy wykorzystaniu proporcjonalności pola powierzchni piku do stężenia odpowiedniego składnika mieszaniny. Porównując stężenie THM- ów w innych częściach miasta stwierdzam, że ogólne stężenie THM- ów w badanych próbkach jest na średnim poziomie.

Różnice w odczytach stężęń pomiędzy wydrukiem, a z krzywych wzorcowych wynikały prawdopodobnie z niedokładnego wyskalowania krzywych.