Lek roślinny wg Farmakopei IX jest badany na:
- Salmonellę
- E. Coli
- bakterie Gram-ujemne tolerujące żółć
- S. aureus
BADANIE JAKOŚCIOWE- badamy obecność:
Jeżeli chodzi o tolerujące żółć, to mamy badanie …..
Jeżeli chodzi o podłoże, to pierwsze co robimy zawsze z próbą
Co to PM1- podłoże namnażające. Jakie podłoże namnażające stosujemy? Bulion z kazeiny i soi. Jeżeli widzimy zmętnienie to wtedy wykonujemy dalej.
Jeżeli mamy tą PM1 to co robimy dalej. Rozcieńczamy, …, przenosimy do bulionu Mosella i przesiewamy na podłoże VRBG. Jest to badanie ilościowe. Posiewamy i później z tego przesiewamy dalej. Patrzymy czy jest zmiana zabarwienia, czy jest zmętnienie.
Salmonella:
Rozcieńczamy, dodajemy do bulionu Rappaporta Vassiliadisa, a następnie przesiewamy na podłoże XLD.
Nie musimy znać czasu inkubacji, ile się posiewa; tylko wiedzieć że coś takiego jest.
E. coli:
Mamy bulion Mac Conkeya i następnie przesiewamy na PM10, czyli Mac Conkey agar.
S. Aureus:
Na PM1 (agar z hydrolizatem kazeiny i soi) a potem na Chapmana (z cytrymidem byłoby w przypadku Pseudomonas aeruginosa)
Leki podawane na skórę dotyczą S. Aureus i P. aeruginosa, czyli szlak jest ten sam do PM1 i wtedy posiewamy tylko osobno na Chapmana i na podłoże z cytrymidem.
OZNACZANIE ILOŚCIOWE:
Nie jest tu określony gatunek, bo na tym podłożu wyrośnie nam wszystko.
Metodą wgłębną. Bierzemy konkretną objętość … na płytkę i na to podłoże i mieszamy. Posiewamy 1ml.
Bakterie: liczymy pomiędzy 15-300 kolonii.
Inne drobnoustroje: poniżej 15 grzyby i laseczki.
Zawsze robimy 2 powtórzenia, by sprawdzić czy pokrywa nam się liczba kolonii- sami siebie sprawdzamy. Jeśli będzie duża różnica pomiędzy tymi dwoma powtórzeniami próbę trzeba będzie powtórzyć.
Jeżeli spodziewamy się leku np. w przypadku leków pochodzenia włókien to wiemy że lek jest bardziej zanieczyszczony i trzeba zastosować większe rozcieńczenia. Staramy się osiągnąć takie rozcieńczenia, które pozwolą nam zidentyfikować drobnoustroje do 300 kolonii. Jeżeli nie to wtedy piszemy, że z danego rozcieńczenia mamy powyżej 300 kolonii i na tym wynik się kończy. Bo jeżeli Farmakopea mówi, że możemy mieć wynik 10*(3) a przy rozcieńczeniu 10*(-8) mamy nadal powyżej 300 to nie ma sensu robić, bo to się nie mieści w normach Farmakopei.
Zliczamy sobie kolonie. Wzór.
Wynik jest liczbą drobnoustrojów w 1ml lub w 1g zawartą między 1,0 a 9,9 pomnożoną przez 10 w odpowiedniej potędze.
Jeżeli mamy lek, którego w ogóle nie porastają drobnoustroje:
Wynik: mniej niż 1/d drobnoustrojów w gramie (ml),
gdzie d jest współczynnikiem rozcieńczenia próbki
Jeżeli dwie płytki zawierają mniej niż 15 kolonii, należy obliczyć średnią arytmetyczną (y) z kolonii policzonych na obu płytkach, a wynik podać w sposób następujący:
NE= y/d gdzie d jest współczynnikiem rozcieńczenia próbki
N- liczba drobnoustrojów
Musimy wiedzieć po co są 2 rozcieńczenia, jakie jest najmniejsze rozcieńczenie, o liczeniu kolonii, jak podajemy wynik.
Podłoże Sabouraud (czyt. Saburo), nie Sabo.
Podsumowując: Mamy osobną ilościówkę na bakterie, osobną na grzyby.
Ta fioletowa płytka to jest VRBG, jest dla tolerujących żółć.
Pani będzie wymagała byśmy zinterpretowali wynik i powiedzieli jak wygląda tor danego leku.
PM9 to Mac Conkey.
InzChemiczna